Тестування на ротавірус в основному передбачає виявлення вірусних антигенів, нуклеїнових кислот або вірусних частинок у зразках фекалій. Загальні методи включають виявлення антигену колоїдного золота, виявлення нуклеїнової кислоти ПЛР та електронну мікроскопію. Конкретний метод слід вибирати, виходячи з клінічних симптомів і лабораторних даних.
Загальні методи виявлення
Виявлення антигену колоїдного золота (швидке виявлення)
Принцип: у цьому методі використовується тест-смужка з колоїдним золотом, мічена специфічними антитілами, для визначення антигенів ротавірусу в калі.
Процедура: невелику кількість зразка калу змішують із розчинником і додають до тест-смужки. Результат визначається за кольоровими смугами (позитивні результати показують дві смуги) через 15-30 хвилин.
Переваги: Швидкість, простота експлуатації та низька вартість; підходить для амбулаторій або закладів первинної медичної допомоги.
Обмеження: Низька чутливість (приблизно 80-90%); можливі помилкові негативні результати; нездатність розрізняти підтипи вірусу.
Виявлення нуклеїнових кислот ПЛР
Принцип: виявлення досягається шляхом ампліфікації-специфічних генних фрагментів ротавірусу (таких як гени VP6 і VP7).
Процедура: РНК вірусу екстрагують з фекалій, здійснюють зворотну транскрипцію в кДНК, а потім ампліфікують за допомогою ПЛР. Результати аналізують за допомогою електрофорезу або флуоресцентних зондів.
Переваги: Висока чутливість (близько 100%), може розрізняти підтипи вірусу (наприклад, G, P), підходить для епідеміологічних досліджень.
Обмеження: потрібне спеціальне обладнання та технічний персонал; висока вартість; тривалий час обробки (приблизно 4-6 годин).
Імуноферментний -аналіз (ELISA)
Принцип: використовує-мічені ферментом антитіла для зв’язування з вірусними антигенами, кількісне визначення за допомогою колориметричної реакції.
Застосовні сценарії: груповий скринінг зразків або сценарії дослідження.
Спостереження за допомогою електронної мікроскопії
Принцип: безпосереднє спостереження частинок ротавірусу (зазвичай у формі-колеса) у зразках фекалій.
Обмеження: Дороге обладнання, складна експлуатація; рідко використовується клінічно.
